• 知悉ELISA實驗影響因素,新手也能獲得完美的實驗結果

    提到ELISA實驗,相信大家都非常熟悉。盡管ELISA實驗操作相對簡單,但在實驗中總會遇到或多或少的問題,導致實驗進展受阻,給實驗者帶來不少困擾。今天,小云就給大家介紹一下ELISA實驗影響因素,希望能夠為您的ELISA實驗順利進行保駕護航。樣本因素樣本因素可分為內源性影響因素和外源性影響因素。一、內源性影響因素大約40%的人血清樣本中含有非特異性干擾物質,可以不同程度影響檢測結果,導致出現假陽性或假陰性的結果。常見的干擾物質有:類風濕因子、補體、交叉反應物質和異嗜性抗體等其他物質等。以類風濕因子和補體為例。1)......

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  • 浪費時間且耗費試劑,ELISA實驗為什么要做預實驗呢?

    說到預實驗,相信做科研的你們一定不陌生。預實驗是開展正式實驗前必不可少的環節之一,主要用于摸索合適的實驗條件及確定實驗的可行性。而使用商品化的ELISA試劑盒,實驗條件和實驗流程都已確定,為什么還要浪費時間且耗費試劑去做預實驗呢?下面就聊聊ELISA實驗中的預實驗。 為什么要做預實驗??? 01 熟悉實驗操作 不同的商業化的試劑盒產品,對于操作細節都會有所差異。比如試劑盒的溫育溫度,有些是4度,有些是常溫,還有些需要在37度恒溫條件下反應。使用商業化的試劑盒,需要嚴格按照試劑盒的說明書要求完成實驗,不......

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  • 神經氨酸酶(NEU)活性蛋白

    神經氨酸酶(Neuraminidase,NEU)是一種能分解(切斷)神經氨酸糖苷鍵的糖苷水解酶。人類基因組中發現至少4種哺乳動物唾液酸酯酶同源物(見NEU1、NEU2、NEU3、NEU4)。體內缺乏神經氨酸酶,導致低聚糖在體內細胞中貯積,會引發唾液酸貯積癥。在細胞內,組織蛋白酶A(Cathepsin A,CTSA)殘基在溶酶體內與β-半乳糖苷酶(Galactosidase Beta,GLb)和神經氨酸酶NEU組成高分子量復合物。CTSA與這些糖苷酶的相互作用對它們進入溶酶體的正確途徑是必須的,并防止它們發生溶酶體內水解。實驗原理:神經氨酸酶NEU可與CTSA結合。本實驗通過......

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  • 兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白

    兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)是幾種降解兒茶酚胺(如多巴胺、腎上腺素和去甲腎上腺素)、兒茶膽固醇以及具有兒茶酚結構的各種藥物和物質的酶之一。COMT有兩種亞型:可溶性短型(S-COMT)和膜結合長型(MB-COMT)。COMT在內源性兒茶酚胺神經遞質、兒茶酚雌激素和異生分子的分解代謝中起重要作用。其通過向兒茶酚胺引入一個甲基,而導致兒茶酚胺神經遞質(多巴胺、腎上腺素和去甲腎上腺素)的失活。兒茶酚胺甲基化的供體是S-腺苷甲硫氨酸(SAM)。任何具有兒茶酚結構的化合物,如兒茶膽固醇和含有兒......

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  • IHC實驗避雷手冊

    免疫組織化學技術又稱免疫細胞化學技術,是指用標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應,對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項免疫檢測方法。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性和分子生物技術的敏感性等巧妙結合,借助顯微鏡的顯像和放大作用,在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(如蛋白質、多肽、酶、激素、病原體以及受體等),是單一的靜止的形態學描述,上升到結構、功能和代謝為一體的動態觀察,為疾病的診斷、鑒別診斷和發病機制的研究提供了強有力的手段。 然而,要想得到一張......

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  • 抗繆勒管激素(AMH)活性蛋白

    抗繆勒管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH)又稱繆勒管抑制物(Mullerianinhibiting substance,MIS),一種二聚體糖蛋白,屬于組織特異性TGF-β超家族生長因子。AMH由產后女性卵巢顆粒細胞(ovarian granulosa cells)及男性睪丸支持細胞(male sertoli cells)表達分泌。在胚胎發育階段,AMH可調節生殖管道的分化和發育,對性別分化至關重要;出生后, AMH可調節男性睪丸間質細胞的功能;在成年女性中,AMH抑制原始卵泡的募集和竇卵泡的發育,防止卵泡過早耗竭。與其他TGF-β家族成員相似,AMH通過絲氨酸/蘇氨酸激酶Ⅰ型受體和Ⅱ型......

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  • 瘦素(LEP)活性蛋白

    瘦素(leptin,LEP)是一種由白色脂肪細胞產生的激素,可通過抑制饑餓來幫助調節能量平衡。其前體由167個氨基酸組成,在血液中被切除N端信號肽,形成Leptin(16kD)。Leptin最為重要的生物學效應是通過下丘腦含神經肽的神經元和神經肽受體介導的,可抑制食欲,減少能量攝取,增加能量消耗以及抑制脂肪合成。盡管調節脂肪儲存被認為是Leptin的主要功能,但它也在生長、生殖等生理過程中發揮作用。除了脂肪細胞和下丘腦細胞,在全身各個組織細胞中都能發現瘦素受體。瘦素和機體系統的病理生理相關性正逐步被人們了解發掘。實驗原理:H......

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  • 肌酸激酶B(CK-BB)活性蛋白

    實驗原理:肌酸激酶BB(CK-BB)是一種肌酸激酶。CK-BB由兩個完全相同的腦型CKB亞單位組成的同二聚體,是一種參與細胞能量穩態的細胞質酶,其某些部分與細胞膜、ATP酶和細胞內多種需要ATP的酶結合。此外,肌酸激酶M(CKM)已被鑒定為CKB的相互作用因子。本實驗通過結合ELISA檢測重組人CK-BB和重組人CKM的相互作用。實驗試劑:APC030Hu01 Active Creatine Kinase B (CK-BB)實驗方法:用含有0.01% BSA的PBS(pH 7.4)梯度稀釋CK-BB。將100μL樣品移入CKM蛋白預包被酶標板中,37℃孵育2小時。棄去孔內液體,用PBST洗滌。除去洗液,加入抗CK-BB......

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